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    細(xì)胞培養(yǎng)室條件有哪些

    時(shí)間:2023-04-21 理論教育 版權(quán)反饋
    【摘要】:無菌室是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)必不可少的無菌操作空間,其面積和結(jié)構(gòu)可依據(jù)條件和要求而定,但必須滿足下列條件。能按要求恒定地向CO2培養(yǎng)箱內(nèi)提供一定濃度的CO 2,同時(shí)保持箱內(nèi)溫度和濕度穩(wěn)定。常用的使用條件為37℃、CO 2濃度為5%。為保持要求的箱內(nèi)濕度,培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置裝有無菌蒸餾水的水槽。使用過程中不要將液氮罐口密封。天平、離心機(jī)、水純化裝置、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋等也是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的常用設(shè)備。


    (一)無菌室

    無菌室是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)必不可少的無菌操作空間,其面積和結(jié)構(gòu)可依據(jù)條件和要求而定,但必須滿足下列條件。①可密閉空間,空間潔凈度應(yīng)達(dá)到10 000級;②通風(fēng)、透氣良好;③內(nèi)部應(yīng)平整光滑,適于擦洗和消毒;④配有殺菌裝置,如:紫外線燈。

    (二)超凈工作臺

    超凈工作臺能利用高效過濾器過濾掉空氣中的微生物,并使無菌空氣以微流方式從工作臺的工作空間流到工作空間外,以保證工作空間的無菌狀態(tài)。工作臺上方通常配有紫外線殺菌燈,用以殺死操作臺面的微生物。使用超凈工作臺前,應(yīng)先用紫外線滅菌燈照射30min,再用75%乙醇擦洗臺面,待關(guān)閉滅菌燈、啟動(dòng)鼓風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5min后,方可進(jìn)行培養(yǎng)操作。

    (三)CO2培養(yǎng)箱

    能按要求恒定地向CO2培養(yǎng)箱內(nèi)提供一定濃度的CO 2,同時(shí)保持箱內(nèi)溫度和濕度穩(wěn)定。常用的使用條件為37℃、CO 2濃度為5%。為保持要求的箱內(nèi)濕度,培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置裝有無菌蒸餾水的水槽。箱內(nèi)空氣必須保持清潔,應(yīng)定期紫外線照射或乙醇消毒。

    (四)倒置顯微鏡

    倒置顯微鏡的一般構(gòu)造與普通顯微鏡相似,有目鏡、物鏡、光源、光路系統(tǒng)等,但倒置顯微鏡光源位于載物臺上方,光線由上至下照射觀察物,物鏡位于載物臺下方。觀察培養(yǎng)細(xì)胞的常用放大倍數(shù)為:物鏡10×或20×,目鏡10×。

    (五)高壓蒸汽滅菌器

    用于實(shí)驗(yàn)用品的消毒滅菌處理。

    (六)冰箱

    用于培養(yǎng)液、緩沖液、消化液等實(shí)驗(yàn)用液體的存放及組織標(biāo)本的短期存放。

    (七)細(xì)胞冷凍保存器

    冷凍保存器常用的是液氮容器,即液氮罐。主要用于細(xì)胞、組織塊等活性材料的長期保存。使用過程中不要將液氮罐口密封。液氮應(yīng)定期加注,加注液氮和取、放標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意個(gè)人防護(hù),以免飛濺液氮傷人。

    (八)其他

    天平、離心機(jī)、水純化裝置、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋等也是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的常用設(shè)備。除常用設(shè)備外,細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室最好還有一些用于特殊檢測的專用設(shè)備如:用于精準(zhǔn)檢測、分選細(xì)胞的流式細(xì)胞儀,用于熒光染色樣本觀察的倒置熒光顯微鏡及用于免疫測定及細(xì)胞毒性和藥物敏感性檢測的酶聯(lián)免疫檢測(酶標(biāo))儀等。

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